一、cKO小鼠模型的核心定義與技術(shù)原理

1. 基本概念

cKO小鼠是通過(guò)時(shí)空特異性基因敲除技術(shù)，在特定組織、細(xì)胞類型或發(fā)育階段選擇性失活目標(biāo)基因的模型。其核心在于克服傳統(tǒng)KO（全身性敲除）的胚胎致死問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)基因功能的精準(zhǔn)解析。

2. 分子機(jī)制：Cre-loxP系統(tǒng)

關(guān)鍵流程：

1. 構(gòu)建flox小鼠（Flanked by loxP）：目標(biāo)基因關(guān)鍵外顯子兩側(cè)插入loxP位點(diǎn)，未激活時(shí)基因功能正常。

2. 與Cre工具鼠雜交：Cre在特定組織表達(dá)后切除floxed基因片段，實(shí)現(xiàn)條件性敲除。

二、cKO模型構(gòu)建的技術(shù)突破與挑戰(zhàn)

1. 技術(shù)瓶頸與解決方案

2. 

三、cKO vs. KO：核心差異與適用場(chǎng)景

1. 功能對(duì)比

2. 選擇指南

四、cKO模型的三大應(yīng)用場(chǎng)景

1. 胚胎致死基因研究

• 案例：DNA聚合酶β（Polβ）全身KO致胚胎死亡，但T細(xì)胞特異性cKO揭示其在免疫應(yīng)答中的功能（Gu et al., 1994）。

2. 組織特異性機(jī)制解析

• 神經(jīng)科學(xué)：多巴胺受體Drd2在神經(jīng)元cKO后，揭示其調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞激活的途徑。

• 腫瘤免疫：PD-1在T細(xì)胞中條件敲除，驗(yàn)證免疫檢查點(diǎn)阻斷療法的細(xì)胞特異性毒性。

3. 時(shí)序性病理模擬

• 誘導(dǎo)型系統(tǒng)：Tamoxifen激活Cre-ERT2，在成年小鼠中敲除Alzheimer相關(guān)基因App，模擬遲發(fā)性神經(jīng)退行。